Wie das Virus funktioniert

Dies ist der zehnte Artikel von Roger Highfield über die Wissenschaft hinter dem Coronavirus, welcher ursprünglich am 22.05.2020 externe Seite veröffentlicht wurde. Sofern verfügbar, wurden Informationen für die Schweiz von focusTerra, ETH Zürich, hinzugefügt und entsprechend gekennzeichnet. Die Übersetzung ins Deutsche erfolgte durch focusTerra.

Können wir Bilder von Viren machen?

Sie können ein Elektronenmikroskop verwenden, um das Virus abzubilden. Wenn wir das Virus sehen, können wir sofort verstehen, warum das Coronavirus seinen Namen bekommen hat - da ist ein kronenartiger Schleier um die Partikel, das sind Spitzen, mit denen es sich an menschliche Zellen anheftet.

Was noch nicht verfügbar ist, ist eine hochauflösende 3D-Rekonstruktion eines ganzen, intakten SARS-CoV-2-Virus.

Viren sind so klein, dass sie mit einem externe Seite herkömmlichen Mikroskop nicht gesehen werden können: Die Wellenlänge des Lichts ist zu groß für diese Aufgabe.

Dieses neue Coronavirus misst etwa 125 Nanometer (125 Milliardstel Meter) im Durchmesser, verglichen mit den etwa 10 Mikrometern (ein Millionstel Meter) einer tierische Zelle und den 400-600 Nanometern Wellenlänge des sichtbaren Lichts. Ein menschliches Haar hat einen Durchmesser von etwa externe Seite 80'000 bis 100'000 Nanometern.

Die Hochspannungselektronen in einem Elektronenmikroskop haben eine Wellenlänge, die klein genug ist, um einzelne Viren als verschwommene Partikel mit ihrem verräterisch dichten Inneren, ihrer Lipid-(Fett-)Hülle und ihren Proteinspitzen zu erkennen.

Sind Viren lebendig?

Viren stehen an der Grenze des Lebens, was externe Seite ein überraschend schlüpfriger Begriff ist, wenn man bedenkt, dass wir alle glauben zu wissen, was Leben ist, wenn wir es sehen.

Jedes einzelne Virus besteht aus einem Paket genetischer Instruktionen, die in eine Hülle aus Fett und Proteinen gehüllt sind, komplexe Moleküle, die aus Aminosäurenketten bestehen, welche die Bausteine von Lebewesen sind.

Ein Virus hat ein einziges Ziel: sich zu vermehren.

Es gibt tatsächlich eine Debatte darüber, ob Viren lebendig sind (ich würde sagen, ja).

Klar ist, dass sie ohne Wirt nicht lebensfähige Parasiten sind; d.H. sie sind auf zelluläre Komponenten angewiesen, um sich zu vermehren – im Falle von SARS-CoV-2 ist das Virus auf unsere zellulären Komponenten angewiesen, um sich zu vermehren.

Wie kann man sich ein detailliertes Bild von einem Coronavirus machen?

Man verwendet einen Computer, um Hunderttausende von separaten elektronenmikroskopischen Bildern eines Virus oder einer seiner Unterkomponenten zu kombinieren und die Bilder so auszurichten, dass man eine durchschnittliche Struktur erhält, die wirklich klar ist, bei einer Auflösung von etwa einem Tausendstel eines Millionstel Meters (einem Nanometer), was ausreicht, um die Form seiner Proteinbausteine zu zeigen.

Die modernste Methode, die seinem LMB-Kollegen Richard Henderson 2017 einen externe Seite Anteil am Nobelpreis einbrachte, ist eine Erweiterung der Elektronenmikroskopie, die als externe Seite kryogene Elektronenmikroskopie, Kryo-Elektronenmikroskopie oder am häufigsten als Kryo-EM bezeichnet wird.

Ältere Formen der Elektronenmikroskopie waren begrenzt, weil die Proben nach dem Beschichten oder Färben mit Metall im Vakuum gehalten werden mussten, um sie besser sichtbar zu machen und dem Beschuss mit Elektronen zu widerstehen.

Mit der Kryo-EM können Virusproben unter natürlicheren "nassen" Bedingungen gehalten werden – eine dünne Schicht aus glasartigem (nichtkristallinem) Eis bei Temperaturen von flüssigem Stickstoff – so dass sie zum einen im Vakuum des Mikroskops nicht trocknen und zum anderen die zerstörerische Wirkung des Elektronenstrahls begrenzt ist.

Selbst bei der Ausrichtung der Bilder von Tausenden von Viruspartikeln, die zusammen eine durchschnittliche Struktur erzeugen, können Elektronenmikroskope Merkmale nur bis zu etwa 150'000 Dalton auflösen, wobei ein Dalton (benannt nach dem bahnbrechenden englischen Physikochemiker externe Seite John Dalton) etwa die Größe eines Wasserstoffatoms hat.

Man sieht nur ein virales Protein, das externe Seite Polymerase genannt wird, aber keine kleineren Enzyme, die externe Seite Proteasen genannt werden, und andere Komponenten, die im Hintergrundrauschen verschwinden.

Wir haben Zugang zu einem der höchstauflösendsten Kryo-EM-Instrumente der Welt (das in der Lage ist, Merkmale aufzulösen, die weniger als einen viertel Nanometer voneinander entfernt sind) und wollen dieses Gerät zur Untersuchung des Virus nutzen. Dies wird unglaublich nützlich sein, da diese Auflösung ausreicht, um ein Atommodell zu erstellen und wir so bei den laufenden Bemühungen, Medikamente zu finden, die aktiver gegen SARS-CoV-2 sind, unterstützt werden.

Wie sieht man die kleineren molekularen Bausteine der Viren?

Wir verwenden noch eine andere Technik, die so genannte externe Seite Röntgenkristallographie, mit der wir noch mehr Details des Virus bis hin zu den einzelnen Atomen erkennen können.

Bestandteile des Virus oder sogar von Virusfragmente, die an ein menschliches Zielprotein gebunden sind, werden zu Kristallen gezüchtet – was schon keine einfache Sache ist, da man dafür viel mehr Viren benötigt als für die Elektronenmikroskopie – so dass Millionen von Viren in geordneter Weise für die Untersuchung mit intensiven Röntgenquellen angeordnet werden.

Da Röntgenstrahlen nicht mit Linsen fokussiert werden können, ist eine hochentwickelte Software erforderlich, um eine "virtuelle Linse" herzustellen, die Bilder von gestreuter Röntgenstrahlung wieder zu einem atomaren Bild zusammensetzen kann.

Inzwischen gibt es etwa 100 verschiedene atomare Modelle (sie wurden in die externe Seite Protein-Datenbank aufgenommen) der Bausteine des Virus, die durch Röntgenkristallographie und Kryo-Elektronenmikroskopie erzeugt wurden.

Die Bilder, die ich vom SARS-CoV-2-Virus gesehen habe, sind immer noch unscharf – warum?

Der Grund dafür ist, dass dieses Coronavirus keine regelmäßige, fußballartige, ikosaedrische Symmetrieform hat, wie so viele andere Viren, so dass es strukturell zu flexibel und heterogen ist, um in Kristalle verpackt zu werden.

Dieses Coronavirus hat eine flüssigere Fett- und Proteinhülle mit Stacheln, was bedeutet, dass jedes Partikel etwas anders ist, was es schwierig macht, ein durchschnittliches Bild zu erstellen.

Die einzige Möglichkeit, ein hochauflösendes Bild zu erhalten, besteht darin, auf ein Viruspartikel zu zoomen und dann eine zeitaufwändige Form der Bildgebung zu verwenden, die als Kryo-EM-Tomographie bezeichnet wird.

Diese Methode wird von meinem Kollegen John Briggs verwendet, der mit Andrew Carter, Leo James und Sjors Scheres zusammenarbeitet. Sie nehmen Bilder von Proben des Virus auf, während sie nach und nach gekippt werden, so dass eine Reihe von 2D-Bildern entstehen, die zu einer 3D-Rekonstruktion kombiniert werden können - genau wie bei der externe Seite Tomographie in der Medizin.

Können Sie verfolgen, wie ein Virus eine menschliche Zelle infiziert?

Der erste Schritt der Infektion besteht darin, dass die Membranen von Virus und menschlicher Zelle verschmelzen und die genetischen Instruktionen des Virus innerhalb der Zelle übermitteln, wo sie von der menschlichen Zellmaschinerie in neue Viruspartikel umgewandelt werden.

Dieser erste Schritt geschieht schnell – im Sekundenbereich – sobald die Priming-Bedingungen erfüllt sind (der richtige pH-Wert und die Spaltung durch eine oder mehrere Proteasen), um eine Formveränderung des Spike-Proteins auszulösen, die den Fusionsprozess einleitet.

Insgesamt dauert es 5-10 Minuten, bis das Virus von der Zelloberfläche internalisiert ist. Danach dauert es einige Stunden, bis sich der genetische Code des Virus repliziert hat und neue Viruspartikel zusammengesetzt sind. Neue Viren könnten so innerhalb von Stunden (weniger als einem Tag) nach der Infektion aus infizierten Zellen entstehen.

Können Sie sehen, was ein Virus in menschlichen Zellen tut?

Wir müssen eine ganze Menge darüber schlussfolgern, was vor sich geht, zum Beispiel aus dem Einfluss des pH-Wertes (Säuregehalt) in inneren Strukturen, die Endosomen genannt werden, aber wir können mit einer Variante der Kryo-EM-Tomographie buchstäblich in Zellen hinbohren.

Man friert eine infizierte Zelle mit einem Blitz ein und erzeugt dann Ausschnitte der Zelle, wobei man Schichten der Zelle mit Strahlen geladener Teilchen, die man Ionen nennt, abträgt, bis die Probe dünn genug ist, um sie im Elektronenmikroskop abzubilden.

Das Fräsen mit Ionenstrahlen ist in jeder Hinsicht eine ziemlich coole Technik und ermöglicht es Ihnen, dynamische Prozesse innerhalb einer einzelnen Zelle sichtbar zu machen, wie z.B. einzelne Coronaviren, die gerade dabei sind, ihre Hülle mit der Hülle der Zelle zu verschmelzen.

Sie werden keine Atome "sehen", aber Sie können Membranen, Proteine und detailliertere Strukturen im Inneren menschlicher Zellen erkennen und sehen, wie sich das Virus vermehrt und selbst zusammensetzt.

Viren haben sich dazu entwickelt, Zellen zu kapern, um mehr Viren zu produzieren.

Der genetische Code des Virus besteht aus einem langen, kettenförmigen Molekül, der so genannten RNA, das die Anweisungen zur Herstellung von Proteinen enthält.

Einige Proteine bilden das Virus selbst, wie der Spike, während andere dem Virus bei der Vermehrung helfen und mysteriöse Namen wie NSP7, NSP8 und NSP12 erhalten, wobei sich NSP auf "Nichtstrukturprotein" bezieht.

Wenn während einer Infektion eine menschliche Zelle befallen wird, um weitere Viren zu produzieren, wird die RNA von viralen Proteinen kopiert und dann von einem anderen Protein namens NSP14 korrekturgelesen. Die neue Kopie der RNA wird von viralen Komponenten, die in der Zelle hergestellt werden, um ein neues Virus zu erzeugen, umhüllt.

Mit Hilfe anderer Coronavirus-Gene – wie NSP3, NSP4 und NSP6 – sammeln sich neu geprägte Viren in Bläschen, in so genannten Vesikeln, an, die sich an die Oberfläche der infizierten menschlichen Zelle bewegen und dann austreten, so dass sich die neuen Viren in Lunge, Rachen und Mund ausbreiten können.

Warum ist es wichtig, diese Details zu sehen?

Durch die Untersuchung jedes einzelnen Schritts im Prozess, durch den Viren unsere Zellen in Virusfabriken verwandeln, erhalten Forschende neue Erkenntnisse und Munition für den Kampf gegen sie.

Wir haben jetzt ein externe Seite wirklich detailliertes Bild des Spike-Proteins, des Hauptmerkmals auf der Außenseite des Virus, das aus zwei Teilen besteht, die S1 und S2 genannt werden.

Kleine Proteine, E und M genannt, sind in die Virusmembran eingebettet (sie sind viel kleiner als Spikes), und ein weiteres, N, befindet sich im Inneren des Virus, um das RNA-Genom zu verpacken und kompakt zu halten.

Mit hochauflösenden Strukturen, wie denen aus der externe Seite Röntgenkristallographie und einigen Kryo-EM-Strukturen, kann man ein Medikament so gestalten, dass es mit einem viralen Protein interferiert, so wie ein Schloss zu einem Schlüssel passt.  

Wie kompliziert ist ein Virus?

Während der Mensch sich auf sechs Milliarden Buchstaben des genetischen Codes stützt, drei Milliarden von jedem Elternteil, stützt sich SARS-CoV-2 auf nur 30'000 "Buchstaben" des genetischen Codes.

Die Reihenfolge der chemischen "Buchstaben" im RNA-Molekül gibt an, wie jeder seiner Bausteine, die Proteine, hergestellt wird. Während der Mensch mindestens 20'000 Proteine hat (externe Seite wahrscheinlich noch viel mehr), hat ein Coronavirus nur 29 Proteine.

Die Umwandlung von viralem genetischen Material in ein Virus unterscheidet sich von der Funktionsweise unserer Zellen. Das genetische Material des Virus, ein RNA-Molekül, wird zunächst in ein langes "Polyprotein" umgewandelt (im Gegensatz dazu bildet jedes menschliche Gen, grob gesagt, ein Protein oder eine Proteinuntereinheit).

Das Virus-Polyprotein wird dann von Enzymen, den so genannten Proteasen, in die 29 Proteine zerlegt, von denen einige viral sind – wie z.B. eines, das NSP5 genannt wird – und einige menschliche Proteasen sind bereits in infizierten Zellen vorhanden.

Meine Kollegen John Briggs und Sean Munro untersuchen die Tatsache, dass ein Medikament von Interesse zur Bekämpfung von COVID-19 ist: Chloroquin. Chloroquin wirkt auf ein kleines menschliches Protein namens Furin, das dabei hilft, das Polyprotein in die Proteine zu zerlegen, die sich zu einem neuen Virus zusammensetzen.

Inwiefern hilft das Wissen über das Spike-Protein bei der Bekämpfung von COVID-19?

Mein Kollege John Briggs führt auch detaillierte Studien über das Virus-Spike-Protein durch, das sich über einen Andockpunkt, einen so genannten Rezeptor, an menschliche Zellen bindet, in diesem Fall ein so genanntes ACE2, das auf ein menschliches Hormon namens Angiotensin anspricht.

Dieses Verständnis könnte bei der Entwicklung von Medikamenten helfen, die wirken könnten, indem sie mit dem Spike interagieren und damit in die Fähigkeit des Virus, menschliche Zellen zu infizieren, eingreifen; aber auch bei der Entwicklung von Tests und Impfstoffen, die beide davon abhängen, wie Immunmoleküle, die von einer infizierten Person hergestellt werden und Antikörper genannt werden, an den Spike binden, um das Virus zu neutralisieren.

Nick Brindle von der Universität Leicester arbeitet zusammen mit meinem Kollegen Julian Sale an der Entwicklung der Region des ACE2-Rezeptors, an die SARS-CoV-2 bindet, um ein Ködermolekül herzustellen, das sich wirksamer an das Virus binden kann.

Zusammen mit meinen LMB-Kollegen – Radu Aricescu, John Briggs, Andrew Carter, Leo James, Jan Löwe (externe Seite der Laborleiter) und Sjors Scheres – haben wir Wege gefunden, gereinigte Fragmente des Spike-Proteins oder ganze Spikes im Labor herzustellen, und sind dem nationalen externe Seite COVID-19-Proteinportal beigetreten, um diese Proteinreagenzien anderen Labors kostenlos zur Verfügung zu stellen.

Spike oder Spike-Fragmente können als Impfstoff injiziert oder als Diagnostikum verwendet werden, um zu sehen, ob Antikörper in Patientenblutes mit dem Virusprotein reagieren, was darauf hindeutet, dass die Person schon einmal mit dem Virus in Berührung gekommen ist.

Wie sonst kann dieses Wissen bei der Entwicklung von Medikamenten helfen?

Nachdem sich die Stacheln auf der Oberfläche des Coronavirus externe Seite an ACE2-Rezeptoren auf der Oberfläche der menschlichen Zielzelle angeheftet haben, gelangt das Virus durch Endozytose in die Zelle, ein Prozess, durch den die Zellen normalerweise Nährstoffe und andere Fracht aufnehmen.

Meine Kollegen Leo James, Harvey McMahon und Sean Munro untersuchen, welche der bekannten Endozytosewege vom Virus ausgenutzt werden. Es ist denkbar, dass ein lokal angewandtes Mittel diese Wege hemmen könnte und daraus ein Medikament entwickelt werden könnte.

Proteine, die chemische Reaktionen durchführen – Enzyme – sind ebenfalls gute Angriffspunkte für Medikamente, da Verbindungen, die in die chemische Reaktion eingreifen, in der Regel auch in die Virusinfektion eingreifen.

Beispiele für SARS-CoV-2-Enzyme sind die Proteasen (NSP3 und NSP5) und die externe Seite Polymerase (NSP12).

Wie finden Sie heraus, wie das Virus die menschliche Zellmaschinerie nutzt?

Wir müssen die Stoffwechselwege menschlicher Zellen verstehen, die die Viren ausnutzen.

Eine Möglichkeit besteht darin, Proteine auszuschalten, um zu sehen, welche Wirkung das hat. Ein anderer Ansatz besteht darin, herauszufinden, welche Proteine mehr oder weniger reichlich vorhanden sind, wenn das Virus eine menschliche Zelle infiziert, um herauszufinden, wie das Virus mit den Zellwegen interagiert.

Ein Schlüsselprotein des Virus ist die Polymerase, mit deren Hilfe das Virus sein genetisches Material kopiert. Meine Kollegen David Barford, Jan Löwe, Sjors Scheres und John Sutherland untersuchen, wie dieses wichtige Enzym durch zwei potenzielle Medikamente von Interesse, Avigan und Remdesivir, gestört wird.  

Wie kidnappt SARS-CoV-2 menschliche Zellen?

Dies scheint etwas mit einer 48-Buchstaben-Schleife der RNA im genetischen Code des Virus zu tun zu haben, die dem Virus hilft, die Übersetzungsmaschinerie der Zelle zu kapern (insbesondere externe Seite riesige molekulare Fabriken, Ribosomen genannt, zelluläre Maschinen, die Gene in Proteine und schliesslich in Fleisch und Blut verwandeln).

In Zusammenarbeit mit Ben Luisi an der Universität Cambridge, Helena Maier am Pirbright-Institut und Bill Scott von der Universität von Kalifornien in Santa Cruz versuchen meine LMB-Kollegen Chris Oubridge und Felix Randow, Proteine oder Nukleinsäuren zu identifizieren, die sich an dieses RNA-Element binden (externe Seite dies wird als RNA-Interferenz bezeichnet).

Wenn sie Erfolg haben, könnte dies mit der Zeit zu einem Medikament führen, das sehr spezifisch für dieses Virus ist.

Leo James und Lori Passmore untersuchen das N-Protein des Virus, von dem man annimmt, dass es die Virus-RNA schützt, indem es die RNA umhüllt, während Venki Ramakrishnan (der den Nobelpreis für externe Seite seine Arbeiten über die molekulare Struktur des Ribosoms erhielt) sich auf ein anderes virales Protein, NSP1, konzentriert, das den Piraten der menschlichen Zellmaschinerie hilft, mehr Virusproteine herzustellen und sie daran hindert, antivirale Proteine herzustellen, die das Virus stoppen könnten.

Was tut Ihr Labor noch in Bezug auf COVID-19?

Wir suchen auch nach einer neuartigen Methode, um Menschen mit Immunität gegen SARS-CoV-2 aufzuspüren, indem wir uns Bakteriophagen (oder einfach Phagen) zunutze machen, also Viren, die Bakterien infizieren.

Phil Holliger, der mit Willem Ouwehand an der Universität Cambridge zusammenarbeitet, verwendet Phagen als das, was sie ein "selbstorganisierendes Reagenz zum Nachweis von Nanopartikeln" nennen.

Phagen sind eines der Arbeitspferde der Molekularbiologie und die Phagentechnologie (für die externe Seite Greg Winter vom LMB 2018 den Nobelpreis erhielt) erlaubt es, Proteine und Peptide (kleine Proteine) auf der Oberfläche des Phagenpartikels zu zeigen.

Sie schlagen vor, Phagenpartikel zu verwenden, die virale COVID-19-Proteine und -Peptide als selbstorganisierende Nanopartikel darstellen, die einfach in Bakterien gezüchtet und in einer kostengünstigen, schnellen und leicht skalierbaren phagenbasierten Untersuchung zum Nachweis und zur Analyse der Anti-SARS-CoV-2-Immunantwort des Patienten verwendet werden können.

Darüber hinaus züchten Madeline Lancaster und Leo James auch Nervenzellen zu "Minihirnen", so genannten Organoiden, um zu sehen, ob Viren in das Nervengewebe eindringen können, und folgen damit den Berichten einiger Patienten mit COVID-19, die neurologische Symptome aufweisen.

Julian Gough macht sich seine Pilotstudie zur externe Seite Vorhersage des Phänotyps Genomdaten zunutze, um herauszufinden, ob Ihr Genotyp (Ihre genetische Ausstattung) zur Vorhersage von COVID-19-Risikofaktoren verwendet werden kann.

In einem früheren Blog-Beitrag wurde festgestellt, dass es externe Seite eine bemerkenswerte Vielfalt in der Art und Weise gibt, wie Menschen auf das Virus reagieren.

Gough fügte hinzu: "Obwohl die Hauptrisikofaktoren bei einer Coronavirus-Infektion das Alter und Vorerkrankungen sind, muss noch festgestellt werden, ob die Genetik auch eine kleine, aber wichtige Rolle spielt ... eine Rolle, die sich für einige Menschen, die nicht wissen, dass sie einem hohen Risiko ausgesetzt sind, als entscheidend erweisen könnte.

Ihr Genom in die medizinische Forschung einzubringen, ist eine wohltätige Spende, die eine grössere Auswirkung auf das Leben der Menschen haben könnte und noch wertvoller ist als eine Geldspende."

Verstehen wir alle 29 Proteine des Virus?

Es gibt viele Dinge über das COVID-19-Virus, die wir nicht verstehen.

Es gibt einige virale Proteine, die eingehender untersucht werden müssen, wie NSP9, das in den Kern der infizierten Zelle eindringt, und NSP15, das dazu beitragen könnte, das genetische Material des Virus zu reinigen, um die Abwehrkräfte einer infizierten Zelle nicht zu alarmieren, sowie ein Protein namens ORF7a, das den Viren helfen könnte, aus den Zellen zu entkommen.

Wir versuchen auch immer noch, die Funktion der viralen Proteine NSP2, NSP11, ORF8 und ORF10 herauszufinden.

Viele andere Laboratorien auf der ganzen Welt arbeiten an der molekularen Funktionsweise der COVID-19-Proteine, von der britischen externe Seite Diamond Light Source of X-Rays über das MRC externe Seite London Institute of Medical Sciences, die externe Seite Universität von Texas in Austin, die externe Seite Tsinghua-Universität, China, und die externe Seite Universität Lübeck, Deutschland.

Das Stoppen der Pandemie, könnte von dem externe Seite Wettlauf um die Visualisierung der SARS-CoV-2-Proteine und die Anwendung dieses Wissens in Tests, Medikamenten und Impfstoffen verlassen.

Das jüngste Bild, wie weit sich die Pandemie ausgebreitet hat, ist auf dem externe Seite Johns Hopkins Coronavirus Resource Center oder dem externe Seite Robert Koch-Institut zu sehen. Sie können die Zahl externe Seite der im Labor bestätigten COVID-19-Fälle und Todesfälle im Vereinigten Königreich sowie die Zahlen des externe Seite Office of National Statistics einsehen.

Weitere Informationen finden Sie in meinen früheren Blogeinträgen, vom externe Seite UKRI, auf diesem externe Seite COVID-19-Portal und in externe Seite Our World in Data.

Anmerkung:

Neuigkeiten Schweiz und ETH Zürich

Die momentane Anzahl der Coronavirus-Fälle in der Schweiz kann auf der externe Seite Webseite des Bundesamts für Gesundheit abgerufen werden. Auch die Webseite des Schweizer Radio und Fernsehens (SRF) bietet eine gute und laufend aktualisierte externe Seite Übersicht zu diversen Daten sowie externe Seite Antworten auf die häufigsten Fragen im Zusammenhang mit COVID-19.

In einer neuen Studie analysieren Forschende der ETH Zürich wie sich eine zweite Pandemiewelle auf die Schweiz auswirken könnte. Ausserdem wird die SwissCovid App, über deren Funktionsweise und Entwicklung im Artikel 8 verschiedene Anmerkungen und weiterführende Links zu finden sind, zurzeit in einer ersten Bewährungsprobe getestet.